高通量組織研磨儀在實(shí)驗(yàn)操作前的預(yù)備工作
2022-02-11 16:24:56
在開(kāi)始對(duì)樣品研磨前,你們會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)研磨設(shè)備有所實(shí)驗(yàn)操作前的應(yīng)用準(zhǔn)備嗎?其實(shí)這個(gè)是非常需要的,而且它的存在還是很重要的一步。下面就讓我們一起去看看高通量組織研磨儀在實(shí)驗(yàn)前都需做哪些準(zhǔn)備工作吧。
高通量研磨儀設(shè)備在實(shí)驗(yàn)操作前,需要先對(duì)實(shí)驗(yàn)應(yīng)用中的PBS緩沖液或磷酸緩沖鹽溶液進(jìn)行4℃的預(yù)冷操作,然后在準(zhǔn)備幾塊冰以做備用。再使用百分之75濃度的乙醇溶液去對(duì)其鑷子和剪刀等耗材進(jìn)行滅菌消毒。如果需要使用高通量研磨設(shè)備從動(dòng)物組織中提取RNA等,需要使用酒精燈對(duì)其進(jìn)行再次消毒滅菌,以盡可能的消除RNA酶。
另外,在實(shí)驗(yàn)中所需應(yīng)用到的實(shí)驗(yàn)耗材均應(yīng)進(jìn)行高溫高壓的滅菌消毒,確保其各種酶不會(huì)對(duì)后續(xù)的實(shí)驗(yàn)造成影響。
通常,實(shí)驗(yàn)所需組織均勻漿的質(zhì)量體積比為百分之10,即1ml液體加入0.1g組織樣本即可。加入適量的PBS緩沖液在離心管內(nèi),并將其離心管置放在冰上進(jìn)行預(yù)冷處理。
把需要研磨的組織樣品在經(jīng)預(yù)冷后,取出,放在冰上,使用消毒過(guò)的鑷子和剪刀將其樣品剪切成小塊狀,然后將其放入相應(yīng)液體的離心管中做備用,并將其離心管放置在冰上預(yù)冷。
根據(jù)每個(gè)離心管的數(shù)量,取出已滅菌的研磨球,將其磨球放入離心管中;為避免造成液體飛濺造成樣品污染,這個(gè)過(guò)程需要使用消毒鍋的鑷子進(jìn)行操作應(yīng)用。
為避免樣品研磨過(guò)程中的交叉污染,除了離心管的封閉研磨外,在實(shí)驗(yàn)中的研磨器材也需要多次的進(jìn)行高壓滅菌消毒。